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1.
Biol. Res ; 46(1): 47-52, 2013. ilus
Article in English | LILACS | ID: lil-676820

ABSTRACT

Mechanical pressure plays an important role in many physiological and pathological processes. Mimicking the mechanical pressure present in vitro is necessary for related research, but usually requires expensive and complicated equipment. In this study we created a simple pressure culture system based on the transwell culture system. By cutting off the top rim of the transwell insert, the cells were compressed between the insert membrane and the well floor. The new pressure culture system was proven effective in that it induced cell morphological change, integrin β1 upregulation, actin polymerization and growth change in rat retinal ganglion cells, human nasopharyngeal carcinoma cells and mice embryonic fibroblasts. Though the pressure value is immeasurable and inhomogeneous, the easily available culture system still provides a choice for the laboratories that do not have access to the better, but much more expensive pressure culture equipment.


Subject(s)
Animals , Humans , Rats , /genetics , Cell Proliferation , Cell Culture Techniques/methods , Analysis of Variance , Actin Cytoskeleton/physiology , Cell Line/physiology , Fibroblasts/physiology , Fluorescent Antibody Technique/methods , Hydrostatic Pressure , Methylamines , Nasopharyngeal Neoplasms/pathology , Primary Cell Culture , Real-Time Polymerase Chain Reaction , Retinal Ganglion Cells/cytology , Retinal Ganglion Cells/physiology , Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction/methods , Stress, Mechanical
2.
Rev. invest. clín ; 52(6): 645-53, nov.-dic. 2000. ilus, graf, CD-ROM
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-295053

ABSTRACT

La muerte celular programada (apoptosis) es un proceso controlado genéticamente. El producto del gen bcl-2 (Bcl-2) es una proteína anti apoptótica integrada a la membrana externa mitocondrial. Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue valorar los efectos de la transfección de bcl-2 sobre la supervivencia, proliferación, fenotipo y morfología en las líneas celulares TF-1, TF-1 neo (control negativo) y TB-1 (TF-1 transfectada con bcl-2). Metodología. Para ello utilizamos el método siguiente: examen del nivel de expresión de los antígenos de superficie CD13, CD34 y c-Kit, respuesta celular al GM-CSF y capacidad de supervivencia luego del retiro del factor de viabilidad. La apoptosis fue evaluada mediante la observación del blebbing membranal a diferentes tiempos luego del retiro del suero, el factor de viabilidad GM-CSF y la tolerancia a toxinas presentes en Justicia spicigera. Resultados. La expresión ectópica de bcl-2 en las células TB-1 previno la muerte celular por apoptosis sin inducir un cambio importante en el fenotipo y morfología en ausencia de GM-CSF, suero o en presencia del extracto de Justicia spicigera. Consistente con la función de Bcl-2, encontramos que la proliferación de la línea celular TB-1 fue muy similar a la línea parental TF-1 en respuesta al GM-CSF y por lo tanto Bcl-2 no altera dicha función. El retiro de suero y GM-CSF al medio de cultivo de las líneas TF-1 y TF-1 neo, induce apoptosis en 36 h. Por el contrario, la línea TB-1 entra en apoptosis a 96 h bajo las mismas condiciones. Conclusiones. Reuniendo los resultados, éstos sugieren que Bcl-2 es un inhibidor de la apoptosis a corto plazo en la línea celular TB-1, no cambia la respuesta al GM-CSF y no afecta el nivel de expresión de otros antígenos de superficie como CD13, CD34 y c-Kit.


Subject(s)
Cell Survival/physiology , In Vitro Techniques , Cell Line/physiology , Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2/ultrastructure , Transfection , Apoptosis/genetics , Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor , Phenotype
3.
Acta physiol. pharmacol. ther. latinoam ; 45(3): 185-91, 1995. ilus, graf
Article in English | LILACS | ID: lil-157059

ABSTRACT

Se estudiaron doce líneas celulares inmortalizadas humanas derivadas de tumores primarios o metástasis de carcinomas pancreáticos, con respecto a su invasividad in vitro. Se hallaron distintos niveles de capacidad invasiva y respuestas quimiotácticas. Con el objeto de determinar el rol de las metaloproteinasas en la invasión del cáncer pancreático, se realizaron zimogramas de medios condicionados de las células. No se hallaron, sin embargo, correlaciones entre la capacidad invasiva y la secreción de gelatinasas en las líneas de carcinomas pancreáticos. Se discuten las posibles causas de los resultados hallados


Subject(s)
Humans , Gelatinases/metabolism , In Vitro Techniques , Metalloproteases/physiology , Pancreatic Neoplasms , Cell Line/physiology , Neoplasm Invasiveness
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